中国海洋大学学报(自科版)

2013, v.43;No.224(12) 48-55

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栉孔扇贝骨形态发生蛋白2基因的克隆及表达分析
Cloning and Expression Analysis of Bone Morphogenetic Protein 2 Gene of Chlamys farreri

封利颖;郭慧慧;李雪;于茜;胡晓丽;张玲玲;王师;包振民;

摘要(Abstract):

骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic protein,BMP)家族成员在动物的骨骼发育及器官形成中发挥着重要作用。本文利用同源克隆策略获得栉孔扇贝(Chlamys farreri)BMP2基因(CfBMP2)的全长cDNA和基因组DNA序列。其中,DNA序列长度为11 252bp,由3个外显子和2个内含子组成;cDNA序列全长3 562bp,含有1 221bp开放阅读框,编码406个氨基酸,与合浦珠母贝(Pinctadafucata)、长牡蛎(Crassostrea gigas)、斑马鱼(Danio rerio)和人(Homo sapiens)的同源蛋白相似性分别为67%、51%、59%和57%。运用实时荧光定量反转录PCR技术(qRT-PCR)对CfBMP2基因的时空表达进行分析。结果表明,在栉孔扇贝早期胚胎中几乎检测不到CfBMP2mRNA,从囊胚期开始有少量该基因表达,在原肠胚时期表达量显著上升,至幼虫期表达量又显著下降。除原肠胚外,在检测的其它发育时期,包括受精卵、4细胞期、担轮幼虫、D型幼虫和壳顶幼虫间,CfBMP2基因表达量没有显著差异。在取样的成体组织中均检测到CfBMP2基因的表达。其中,鳃中CfBMP2的表达量显著高于其它组织,外套膜次之。在横纹肌、性腺、肾和消化腺中,CfBMP2表达量较低且在这4种组织间无显著差异。上述研究结果提示,CfBMP2可能参与栉孔扇贝的器官组织发生和壳的生长。

关键词(KeyWords): 栉孔扇贝;骨形态发生蛋白2;基因克隆;表达分析

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(30972239);; 中国科学院海洋生物资源可持续利用重点实验室(LMB)开放基金项目;; 国家科技支撑计划项目(2011BAD13B06);; 中国海洋大学水生生物种质资源标准化及资源共享项目资助

作者(Author): 封利颖;郭慧慧;李雪;于茜;胡晓丽;张玲玲;王师;包振民;

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